是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術.

 

 

　　免疫組織化學技術按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自影法等.實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片.

 

　　其中石蠟切片是制作組織標本最常用、最基本的方法,對于組織形態(tài)保存好,且能作連續(xù)切片,有利于各種染色對照觀察;還能長期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過程對組織內抗原暴露有一定的影響,但可進行抗原修復,是免疫組化中首選的組織標本制作方法.

 

　　免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體.單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備.多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物.

 

　　均一性.一種單抗中,每個抗體的化學結構和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類.即單抗是一種純度很高的均一抗體.而從不同動物,不同時期所得到的多抗,各有不同的化學組成.多抗是多種種類和亞類Ig的混合物.穩(wěn)定性.單抗的穩(wěn)定性較差,對PH變化敏感,對熱不穩(wěn)定,提純過程中易變性,而多抗的穩(wěn)定性則較好.

 

　　特異性.單抗是單一地針對抗原的某一決定簇,所以用它進行血清學反應時,特異性強,敏感性高,一般不發(fā)生交叉反應,而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結合,所以特異性較差,較易引起交叉反應.重復性.單抗的重復性好,而多抗每批都不一樣.